RT-qPCR原理的三个主要步骤： 1 反转录： 使用逆转录酶和特定引物将RNA样品反转录成cDNA。 该步骤将RNA模板转化为更稳定且可扩增的DNA形式。 反转录过程中使用特定引物。 2 PCR扩增： 使用 …

qPCR就是quantity PCR，定量PCR，也是荧光定量PCR，检测基因转录水平的表达量。 PCR就是一种技术，通过高温变性、低温复性，适温延伸的循环来扩增基因片段。 PCR根据不同的实验目的可以分 …

荧光定量PCR，简称qPCR，也叫实时荧光定量聚合酶链式反应，其核心原理是在常规PCR扩增的基础上，借助荧光信号的实时监测，实现对模板DNA的精准定量分析。 对应的操作技术则是围绕精准控温 …

qPCR，也称实时定量PCR，是指在PCR扩增反应体系中加入荧光染料或荧光基团，通过收集荧光信号实时监测扩增产物的量的变化，最后通过标准曲线和Ct值对待测样品进行定量分析。

常规qPCR的扩增片段长度，建议控制在80到200 bp之间。 片段短一点，扩增效率会更高，能避免因为片段太长导致扩增不彻底的问题。 另外，要避开基因的可变剪接区域，如果是研究特定转录本，就得 …

1.qPCR试剂盒 按照MIQE要求，我们必须在文章中清楚的描述完整的反应条件，包括PCR的反应体系配置，用的什么试剂盒，制造商是谁，多大的反应体系，用的是染料法还是探针法。 事情并非仅仅描 …

Jun 16, 2021 · 实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)/qRT-PCR，是指在PCR反应体系中加入荧光标记物，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析 …

Jun 13, 2022 · ChIP-qPCR 数据需要针对可变性来源进行标准化，包括染色质数量、免疫沉淀的效率（富集效率）和 DNA 回收率。 两种常用的标准化 ChIP-qPCR 数据方法—— Percent Input法 和 富集倍 …

前向引物：位于外显子3的特异性区域。 反向引物：跨越外显子3和4的剪接点。 引物序列 前向引物：5’-AGCTGCTGCTGCTGCTGCTG-3’ 反向引物：5’-TGCTGCTGCTGCTGCTGCTG-3’ 通过以上步骤和 …

内参ct值21偏高了，一般来说内参ct16-18左右比较合适，侧面反应出你cDNA总量加少了（高概率），或者你的样本里面有抑制反应的成分（低概率），或者实验试剂或操作有问题（极低概率）。 cDNA量 …